Предупреждение анализатора g1 g2 при анализе крови
(трактовка результатов исследований, выполненных
на гематологических анализаторах)
Ю.В. Первушин, * С.А. Луговская,**, Л.А. Марченко*, В.Н. Иванова*
* ГОУ ВПО Ставропольская государственная медицинская академия Росздрава, кафедра клинической лабораторной диагностики ФПО,
**ГОУ ДПО Российская медицинская академия последипломного образования, кафедра клинической лабораторной диагностики.
Сравнительно недавно только единичные клинико-диагностические лаборатории (КДЛ) имели возможность проводить гематологические исследования на автоматических анализаторах. Исследования крови выполняемые «ручными» методами имели большие погрешности, не было лечебно-профилактических учреждений (ЛПУ), в которых бы регулярно не высказывали претензий к качеству лабораторных исследований и, особенно, к исследованию крови. В настоящее время произошли кардинальные изменения. Многие крупные ЛПУ смогли оснастить КДЛ современными гематологическими анализаторами. В рамках приоритетного национального проекта «Здоровье» в КДЛ первичного звена здравоохранения поступили наборы лабораторного оборудования, включающие гематологические анализаторы. Таким образом, гематологические анализаторы появились — в городских, районных и детских поликлиниках, поликлинических отделениях центральных городских и районных больниц.
В настоящее время, рациональное использование лабораторного оборудования, поступающего в рамках Национального проекта, возможно, только при достаточной подготовленности врачей первичного звена здравоохранения и всех врачей клинических дисциплин к правильной трактовке получаемых результатов лабораторного исследования. Врачи должны ясно представлять себе:
- возможности нового оборудования
- трактовку результатов исследований,
- те погрешности, которые могут возникать в процессе проведения анализа,
- возмущающее влияние различных факторов (лекарственные препараты, лечебные процедуры, физические нагрузки, физиологические состояния и многие другие воздействия) на результаты лабораторных исследований.
Преимуществами автоматического анализа крови являются:
- высокая производительность (до 100 и более проб в час),
- небольшой объем крови (12-50 мкл),
- оценка более 20 показателей, вместо 10-12 при обычном анализе крови,
- внедрение в практику лабораторных исследований новых показателей, существенно расширяющих возможности диагностики,
- графическое представление распределения клеток (гистограммы, скетограммы),
- высокая точность исследования, так как подсчету подвергаются несколько тысяч клеток из одной пробы.
Оценивать результаты исследований крови, полученные на гематологическом анализаторе, необходимо в контексте с клиническими данными и состоянием больного. Следует помнить, что изменения клеточного состава могут наблюдаться, как при различных физиологических состояниях организма, так и вследствие проводимых лечебных и диагностических воздействий, оперативных вмешательств, лекарственного лечения, а также следует учитывать тяжесть процесса, реактивность больного, сопутствующие осложнения.
Контроль преаналитических факторов в гематологических исследованиях является ключевым для обеспечения качественных результатов тестов. Такие преаналитические характеристики, как взятие пробы, транспортировка и хранение образца, влияние лекарственных препаратов, а также факторы, связанные с подготовкой пациента, могут привести к неверным или неточным результатам анализов и, следовательно, к постановке ошибочного диагноза, что может повлечь за собой риск для здоровья пациента. Снижение числа ошибок на любой стадии преаналитического этапа может существенно улучшить качество гематологических анализов, снизить количество повторных проб и сократить расходы рабочего времени и средств, выделяемых на обследование пациентов. Одна из задач, стоящих перед врачом-клиницистом довести до сведения пациента правила подготовки к взятию крови и обеспечить правильность взятия крови процедурными медицинскими сестрами в отделениях.
При плановом назначении лабораторного теста кровь следует брать натощак (после примерно 12 ч голодания, воздержания от приема алкоголя и курения), между 7 и 9 ч утра, при минимальной физической активности непосредственно перед взятием (в течение 20—30 мин), в положении пациента лежа или сидя.
Лучшим материалом для клинического исследования крови является венозная кровь. Это обусловлено тем, что при известной стандартизации процессов взятия, хранения, транспортировки крови удается добиться минимальной травматизации и активации клеток, примеси других веществ (тканевой жидкости), при этом всегда имеется возможность повторить и/или расширить анализ (например, добавить исследование ретикулоцитов).
Взятие венозной крови облегчается применением закрытых вакуумных систем. Метод взятия крови с помощью закрытых вакуумных систем имеет ряд преимуществ, основными из которых являются обеспечение высокого качества пробы и предотвращение любого контакта с кровью пациента, а значит, обеспечение безопасности медицинского персонала и других пациентов.
Пункция кожи с целью получения капиллярной крови является процедурой выбора, если требуется взять небольшое количество крови. Для гематологических исследований капиллярную кровь рекомендуется брать в следующих случаях: при ожогах, занимающих большую площадь поверхности тела пациента; при наличии у пациента мелких или труднодоступных вен; при выраженном ожирении пациента; при установленной склонности к венозному тромбозу; у новорожденных.
При трактовке результатов исследований проведенных на гематологическом анализаторе мы рекомендуем пользоваться принятыми в Российской Федерации нормами (табл. 1). Весьма желательно, чтобы во все гематологические анализаторы были введены именно эти показатели нормальной гемограммы.
Таблица 1.
Нормальные показатели периферической крови у взрослых
Показатель | Нормальные
значения |
|
мужчины | женщины | |
RBC, эритроциты х 1012/л | 4,0-5,0 | 3,9-4,7 |
HGB, гемоглобин, г/л
г/дл |
130,0-160,0 | 120,0-140,0 |
13,0-16,0 | 12,0-14,0 | |
НСТ, гематокрит,% | 40-48 | 36-42 |
MCV, средний объем эритроцита, фл, мкм3 | 80,0-100,0 | |
MCH, cреднее содержание гемоглобина
в эритроците, пг |
27,0-31,0 | |
MCHC, средняя концентрация %
гемоглобина в эритроците, г/л |
30,0-38,0
300 — 380 |
|
RDW, ширина распределения RBC по объему | 11,5-14,5% | |
Ретикулоциты,‰ | 2,0-10,0 | |
WBC, лейкоциты х 109/л | 4,0-9,0 | |
Нейтрофилы, %,(109/л): палочкоядерные
сегментоядерные |
1,0-6,0 (0,040-0,300)
47,0-72,0 (2,000-5,500) |
|
Эозинофилы %,(109/л) | 0,5-5,0 (0,020-0,300) | |
Базофилы %,(109/л) | 0-1,0 (0-0,065) | |
Лимфоциты %,(109/л) | 19,0-37,0 (1,200-3,000) | |
Моноциты %,(109/л) | 3,0-11,0 (0,090-0,600) | |
Плазматические клетки | — | |
Тромбоциты х 109/л | 180,0-320,0 | |
СОЭ, мм/час | 2,0-10,0 | 2,0-15,0 |
Само исследование крови в гематологических анализаторах имеет ряд особенностей. Так перед анализом вся кровь разделяется на две части.
Первая часть разводится дилюентом и происходит подсчет всех клеток содержащихся в растворе. Клетки объемом менее 30 фл подсчитываются и рассматриваются как тромбоциты, все остальные клетки – как эритроциты. Поскольку размеры лейкоцитов близки к размерам эритроцитов, разделить их не удается. При использовании кондуктометрических счетчиков в подсчет эритроцитов неизбежно будут входить лейкоциты. Таким образом, в анализе гематологического анализатора в графе эритроциты (RBC), практически оказывается сумма RBC и лейкоцитов (WBC). Однако, за исключением явных лейкоцитозов, их вклад будет чрезвычайно мал, так как в норме концентрация эритроцитов в крови на 3 порядка превышает концентрацию лейкоцитов.
Например, при содержании RBC 5 х1012/л и WBC 5х109л анализатор определит общее количество RBC – 5,005 х1012/л и ошибка составит всего 0,1%, что значительно ниже, чем ошибка самого прибора.
Только, при значительном увеличении числа WBC ошибка подсчета RBC прогрессивно нарастает, а при лейкоцитозе более 50*109/л может искажаться и показатель объема эритроцитов (MCV).
Ко второй части крови добавляется лизирующий реактив. Он вызывает полный гемолиз эритроцитов, после чего все подсчитанные клетки объемом более 35 фл идентифицируются, как лейкоциты. В этой же порции фотометрические определяется содержание гемоглобина (HGB).
Клиническое значение определения основных
показателей эритроидного ростка
Клиническое значение определения основных показателей эритроидного ростка – эритроцитов (RGB), гемоглобина (HGB) и гематокрита (HCT) давно и подробно описано и хорошо известно врачам-клиницистам, и потому на этих показателях подробно останавливаться не будем. Отметим только, что при определении на гематологическом анализаторе RBC возможны ошибки измерения.
Ложнозавышенные результаты анализа RBC наблюдаются при наличии в крови:
• гигантских тромбоцитов (с объемом более 30 фл);
• криоглобулинов
Ложное занижение результатов определения RBC может быть следствием:
• агглютинации эритроцитов;
• выраженного микроцитоза эритроцитов (тогда они воспринимаются аналиазатором,как тромбоциты).
Завышение результатов при определении HGB наблюдается при:
- высоких лейкоцитозах (более 50х109/л);
- гиперлипидемии;
- гипербилирубинемии;
- присутствии нестабильных гемоглобинов (Hb S, НЬ С);
- криоглобулинемии.
Следует учитывать, что если нестабильные гемоглобины и криоглобулинемия встречается не слишком часто, то первые три пункта нередко могут существенно исказить результаты выполненного исследования.
Так в одну из больниц города Ставрополя в отделение интенсивной терапии поступила больная С-ва в тяжелом состоянии с выраженной гипергликемией и явлениями кетоацидоза. При исследовании гемограммы получен следующий результат:
Анализ ОИТАР-1 Время 10:16
Дата: 19/01/2007 С____ВА
Номер: 119
Т: 26.9 С
WBC : 22,1 H 103/mm3 ( 4,0 — 9,0) MCV : 89 μm3 (75 — 95)
RBC : 4,06 106/mm3 (3,9- 5,0) MCH : 52,2 H pg (24 – 34 )
HGB : 21,2 H g/dl (12,0-16,0) MCHC: 58,7 H g/dl (30,0-38,0)
HCT : 36,1 % (36,0 -48,0) RDW : 14,3 % (11,5-14,5)
PLT : 387 103/mm3 ( 150 — 400) MPV : 8 μm3 ( 7,4-10,4)
PCT : .311 % (.150- .400) PDW : 12,9 % (10,0-20,0)
WBC флаги : G1; G2
Диф. :
%LYM: 17,5 L % (19,0 — 37,0) #LYM: 3,8 H 103/mm3 (1,2-3,0)
%MON: 6,1 % (3,0 — 11,0) #MON: 1,3 H 103/mm3 (0,1-0,6)
%GRA: 76,4 H % (47,0-72,0) # GRA: 17,0 H 103/mm3 (2,0-5,5)
При оценке результатов обследования обращает на себя внимание не только чрезвычайное повышение HGB (до 212 г/л) и связанных с ним индексов MCH и MCHC (последний до невероятных величин), но и относительно нормальные показатели RBC и HCT. Все это бесспорно свидетельствовало об ошибке при определении HGB. Причиной ошибки явилась выраженная мутность («хилезность») сыворотки как следствие гипертриглицеридемии и повышения в сыворотке липопротеинов очень низкой плотности. Если бы в КДЛ не поступила кровь для биохимического исследования и не была бы получен сыворотка, вопрос о причинах ошибки мог бы остаться невыясненным. Аналогичные примеры можно привести и у больных с гипербилирубинемией – при желтухах различной этиологии.
НСТ в гематологических анализаторах не определяется, а рассчитывается, исходя из показателей RBC и MCV. Он представлен суммой прямо измеренных объемов эритроцитов в единице объема крови. Таким образом, не существует проблемы «остаточной» плазмы (плазмы оставшейся между эритроцитами при центрифугировании). Но именно поэтому результаты определения гематокрита методом центрифугирования (в гематокритной центрифуге, но не в пробирке – последнее запрещено!) и данные, полученные при исследовании гематологическим анализатором, будут отличаться. А, следовательно, для получения сравнимых результатов, желательно в процессе обследования пациента пользоваться каким-то одним из этих двух методов.
Кроме этого на результаты исследования HCT оказывает существенное влияние разведение крови изотоническим раствором, в котором эритроцит принимает оптимальный объем, отличающийся от того, который он имел в крови сосудистого русла. Существенные отличия будут в том случае, если у больного при взятии крови наблюдалось повышение или снижение осмотического давления плазмы (что нередко наблюдается у больных реанимационных отделений).
Источник: ru.convdocs.org